Este microscopio confocal permite detectar fluorescencia en dos y tres canales simultáneamente visualizando también la luz transmitida con óptica DIC; permite realizar series en el plano Z para reconstrucciones 3D; captura de una secuencia en el tiempo para experimentos in vivo. Utiliza un microscopio invertido OLYMPUS IX81 con los siguientes objetivos:

10x   NA 0.30 uplan FL N
20x   NA 0.50 uplan FL N
40x   NA 1.30 uplan FL N oil
60x   NA 1.35 uplan Sapo oil
100x NA 1.40 uplan Sapo oil

Las unidades laser que posee son los siguientes: 

Láser Gaseoso Multi Argón de 40 mW (458/488/515nm)
Láser Verde Helio Neón 543nm
Láser Rojo Helio Neón 633nm
Láser de estado sólido 440nm

El software Fluoview v 5.0 permite manejar fácilmente las diferentes capturas que se pueden realizar con este equipo.

Microscopio Sistema Olympus LSM Fluoview 1000, microscopio Olympus IX81 (invertido)
Objetivos 10x NA 0.30 uplan FL N
20x NA 0.50 uplan FL N
40x NA 1.30 uplan FL N oil
60x NA 1.35 uplanSapo oil 
100x NA 1.4 uplan Sapo oil
Detección PMT
Software Fluoview v 5.0
Otros rueda de filtros motorizada, rueda de objetivos motorizada en el plano Z
Deteccion de fluorescencia: Fuente de luz Láser Gaseoso Multi Argón de 40 mW (458/488/515nm)
Láser Gaseoso Verde Helio Neón 543nm
Láser Gaseoso Rojo Helio Neón 633nm 
Láser de estado sólido 440nm
Filtro Exitación DM 488/546/633
BS 20/80
DM 405/488
DM 405-440/515
DM 405-440
Filtro Emisión Canal 1: BA 465-495
BA 505-525
BA 480-495
Filtro Emisión Canal 2: BA 505 IF
BA 560-620
BA 535-565
BA 520-550
Filtro Emisión Canal 3: BA 650 IF
BA 560 IF
  • Observación de muestras teñidas con fluoróforos de longitud de onda definidos.

  • Observación de muestras teñidas con tinciones vitales fluorescentes (lysotracker, mitotracker, etc…)


  • Posibilidad de realizar cortes ópticos y de esta forma tener una serie de imágenes en el eje Z de la muestra, con posibilidades de realizar reconstrucciones 3D


  • Captura de 3 fluoróforos simultáneos


  • FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) en células fijadas

Microscopio confocal Olympus Fluoview LSM 1000

Neurona de cultivo primario de neuronas hipocampales de embriones de rata de 18 días (DIV21). Los marcadores utilizados son: en verde GAD65 (enzima encargada de la síntesis de GABA) y en rojo sinapsina (proteína presináptica). Magnificacion 400X

Autor: Paula Slater. Alumna de doctorado, Laboratorio de Biología Celular y Molecular de la Adicción.
Microscopio confocal Olympus Fluoview LSM 1000

Neurona gabaérgica de cultivo primario de neuronas hipocampales de embriones de rata de 18 días (DIV21). Los marcadores utilizados son: en verde GAD65 (enzima encargada de la síntesis de GABA), y en rojo sinapsina (proteína presináptica)

Autor: Paula Slater PhD (c), Laboratorio de Biología Celular y molecular de la adicción, FCB PUC.
Astrocitos

Equipo: Microscopio confocal Olympus Fluoview LSM 1000. Técnica: Confocal. Muestra: Cultivo primario de astrocitos de ratón en inmunofluorescencia indirecta. En la imagen se muestran astrocitos GFAP positivos en rojo (GFAP-555), la presencia de hemicanales de conexina 43, en verde (Cx43 conjugado con Alexa 488). Barra de escala = 20um. Magnificación 60x.

Autor: Fernanda Gárate, UMA-BIO
Astrocitos

Equipo: Microscopio confocal Olympus Fluoview LSM 1000. Técnica: Confocal. Muestra: Cultivo primario de astrocitos de ratón en inmunofluorescencia indirecta. En la imagen se muestran astrocitos GFAP positivos en rojo (GFAP-555), la presencia de hemicanales de conexina 43, en verde (Cx43 conjugado con Alexa 488). Barra de escala = 40um. Magnificación 40x.

Autor: Fernanda Gárate, UMA-BIO