Sistema de microscopía confocal que optimiza tanto la captura temporal de experimentos in vivo como muestras fijadas, gracias a la combinación de la unidad de spinning disk compuesta por un disco giratorio (DSU, 3000-5600 rpm) el cual contiene un patrón de ranuras que crea un pinhole virtual, filtrando la luz que proviene fuera del plano focal; una cámara CCD enfriada; un sistema de iluminación de fluorescencia de alta potencia; ruedas de filtros rápidas (cambio de filtro adyacente 58 ms) y un controlador de tiempo real (RTC).

Microscopio IX81 invertido; enfoque, revolver y condensador motorizados. Tamaño de paso del sistema de enfoque 0,01 um.
Objetivos con DIC 10x UPLSAPO N.A 0.4 W.D 3.1 mm
40x UPLSAPO N.A 0.95 W.D 0.18 mm con anillo de corrección entre 0.13 y 0.21 mm
60x UPLSAPO WATER N.A 1.2 W.D 0.28 mm con anillo de corrección entre 0.13 y 0.21 mm
100x UPLSAPO OIL N.A 1.4 W.D 0.13 mm
Detección Cámara CCD Retiga-4000R, tamaño de pixel 7.4 um x 7.4 um.
Sotware CellSens Dimension v 1.14
Fuente de luz Marca: Excelitas Modelo: X-cite exacte Lámpara de vapor de mercurio de 200W, 2000hrs de duración, pre centrada con conexión a través de guías de iluminación líquidas. Shutter e intensidad de iluminación automatizada.
Filtros rueda manual 1. DSU/mirror
2. DAPI U-N31000V2
3. CFP U-MCFPHQ
4. GFP U-MGFPHQ
5. RFP U-MRFPHQ
6. DICT IX2-MDICT
Filtros rueda de emisión 1 DSU 1. DSU Mirror
2. QUAD U-N8900 D/F/TX/CY5
3. CFP/YFP U-N86002
4. FURA 2 U-N71000V2
5. free
6. U-MDICT3
Rueda de emisión 2 U-FFWO 1. OPEN (sin filtro)
2. DAPI (ET 455/50)
3. FITC (ET 525/36)
4. TX RED (ET 605/52)
5. CY5 (ET 705/72)
6. CFP (S 470/30)
7. YFP (S 535/30)
8. OPEN (sin filtro)
Rueda de excitación U-FFWR (conectada a RTC) 1. CY5 (645/30)
2. DAPI ( D 350/50)
3. CFP (430/25)
4. FITC (490/20)
5. YFP (500/20)
6. TX RED (555/25)
7. FURA 2 D340
8. FURA 2 D380
Disco DSU objetivo 10x Confocalidad óptima D2, brillo óptimo D1
Disco DSU objetivo 40x Confocalidad óptima D1, brillo óptimo D3
Disco DSU objetivo 60x Confocalidad óptima D1, brillo óptimo D3
Disco DSU objetivo 100x Confocalidad óptima D3, brillo óptimo D4
  • Inmunofluorescencia y detección de sondas.

  • Time-lapse (Series Temporales) en células vivas.

  • Series en Z (z-stack).

  • Campo claro y Técnica DIC (Differential interference contrast or Nomarski interference contrast).

Microscopio Confocal Spinning Disk

Muestra: Cerebro de mosca adulto (Drosophila melanogaster). En verde subpoblación de neuronas pdf (+). En rojo Tirosina hidroxilasa. En azul los núcleos.

Autor: Constanza Gonzalez, Laboratorio de Neurodesarrollo, Facultad de Ciencias Biológicas, P. Universidad Católica de Chile.